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一、 產品基礎信息描述
• 產品貨號：ab150077
• 英文全稱：Goat anti-Rabbit IgG H&L (Alexa Fluor® 488)
• 中文命名：Alexa Fluor® 488標記的山羊抗兔IgG二抗（H+L）
• 品牌歸屬：Abcam
• 宿主來源：山羊（Goat）
• 靶向種屬：兔（Rabbit）
• 抗體特異性：靶向IgG的重鏈（Heavy Chain）與輕鏈（Light Chain），即H+L
• 偶聯熒光基團：Alexa Fluor® 488
• 純化方式：抗原親和純化（Immunogen affinity purified）
• 抗體克隆性：多克隆抗體（Polyclonal），同型為IgG
• 物理形態：液體（含23%甘油、PBS、1% BSA以及0.02%疊氮鈉防腐劑）
• 激發/發射波長：Ex/Em = 495 nm / 519 nm
• 推薦規格：常見規格為500 μL（具體以實際采購包裝為準）
二、 核心產品特點與優勢剖析
1. 明亮且穩定的熒光輸出
借助經典的Alexa Fluor® 488熒光染料，ab150077展現出出色的摩爾消光系數與熒光量子產率。與傳統FITC相比，其光穩定性顯著提升，這意味著在激光照射下不易發生光漂白，為您爭取了更充裕的圖像采集與觀察時間，尤其適合低豐度靶點的微弱信號捕獲。
2. 寬泛的pH耐受性
實驗環境的酸堿度往往會影響熒光集團的發光效率。Alexa Fluor® 488在pH 4.0至10.0的區間內均能保持良好的熒光強度，最佳表現區間為pH 6.5-8.5，這賦予了其實驗條件普適性。
3. 極低的種屬交叉反應
作為經過嚴格親和純化的山羊源二抗，ab150077對人、小鼠、大鼠、倉鼠、牛、馬、豬、猴等多種常見實驗動物的IgG均表現出極低的交叉吸附（Pre-adsorbed），極大程度地壓低了非特異性結合的背景噪音。
4. 多平臺應用的“多面手"
無論是在細胞水平進行精細定位，還是在懸液體系中分析細胞亞群，亦或是在組織切片上探尋抗原分布，這款二抗均能提供穩健可靠的信號放大作用。
三、 工作原理與信號放大機制
要駕馭好一款工具，首先要洞悉它的底層邏輯。ab150077的工作原理建立在免疫學抗原-抗體特異性結合的基礎之上。
在一抗（Primary Antibody）與目標抗原（Target Antigen）發生特異性結合后，一抗的恒定區（Fc段）或可變區（Fab段）會成為新的抗原表位。此時，帶有熒光標簽的ab150077作為二抗，能夠精準識別并結合一抗的IgG骨架。由于每個一抗分子上可以結合多個二抗分子，這種級聯放大效應使得初始的抗原信號得到了指數級的增強。
具體而言，當使用488 nm波長的激光（如流式細胞儀的氬離子激光器）或汞/氙燈光源激發時，ab150077上的Alexa Fluor® 488染料吸收光子能量，其電子躍遷至激發態。當電子回落至基態時，便會釋放出波長為519 nm的光子，即我們肉眼所見的明亮綠光。通過檢測器或濾光片（如流式常用的525/30 nm帶通濾光片），即可將這種光信號轉化為定量數據或可視化圖像。
四、 攻克實驗痛點：它能為您解決哪些問題？
• 痛點一：信號太弱，找不到陽性細胞
對策：得益于高亮度的Alexa Fluor® 488標簽，ab150077能夠敏銳捕捉低表達量的目標蛋白，讓微弱信號無所遁形。
• 痛點二：背景太高，特異性差
對策：通過優化的純化工藝，該二抗有效去除了雜抗體和非特異性結合位點，配合其極低的種屬交叉反應，能夠幫助您獲得高信噪比的干凈圖譜。
• 痛點三：拍照時熒光猝滅太快
對策：其光穩定性允許您進行長時間的共聚焦Z-stack掃描或3D重構，而不必擔心信號在拍攝過程中迅速衰減。
• 痛點四：多色panel設計困難，光譜串色嚴重
對策：Alexa Fluor® 488的光譜峰形尖銳，與常見的細胞核染料（如DAPI）以及橙/紅色染料（如Alexa Fluor® 594、Texas Red）的光譜重疊極小，是構建多色實驗體系的理想之選。
五、 全流程使用方法與操作建議
1. 免疫熒光 / 免疫細胞化學 (ICC/IF)
• 推薦稀釋比例：1/200 - 1/1000（例如：1 µg/mL - 2 µg/mL的工作濃度）
• 操作步驟：
1. 樣本固定與透化：根據目標蛋白的亞細胞定位，選擇合適的固定劑（如4%多聚甲醛）和透化劑（如0.1% Triton X-100）。
2. 封閉：使用含1%-3% BSA或正常山羊血清的PBS溶液封閉30-60分鐘，以阻斷非特異性結合位點。
3. 一抗孵育：棄去封閉液，加入用封閉液稀釋好的一抗，4℃過夜孵育。
4. 二抗孵育：PBST洗滌三次后，加入用封閉液稀釋的ab150077，室溫下避光孵育1小時。
5. 復染與封片：再次洗滌后，使用DAPI進行細胞核復染，然后用抗熒光猝滅封片劑封片觀察。
2. 流式細胞術 (Flow Cytometry)
• 推薦稀釋比例：1/2000 - 1/4000
• 操作步驟：
1. 細胞制備：獲取單細胞懸液，用4%多聚甲醛進行表面抗原固定。
2. 透化（針對胞內標志物）：若檢測胞內因子，需用90%預冷甲醇或專用透化劑處理。
3. 封閉與一抗孵育：用含10%正常血清的PBS封閉15分鐘，隨后加入一抗，室溫避光孵育30-60分鐘。
4. 二抗孵育：PBS洗滌后，加入稀釋好的ab150077，室溫避光孵育20-30分鐘。
5. 上機分析：最后用PBS洗滌1-2次，重懸于500 µL PBS中，轉移至流式管中上機檢測（FITC通道）。
3. 免疫組織化學 (IHC-Fr / IHC-P)
• 推薦稀釋比例：需根據具體組織及一抗效價進行預實驗摸索（常規范圍多在1/200 - 1/1000）。
• 操作要點：石蠟切片需先進行脫蠟、水化及高溫抗原修復（如檸檬酸鈉緩沖液，pH 6.0或Tris/EDTA緩沖液，pH 9.0）。后續封閉、一抗/二抗孵育及復染流程與IF類似，需注意全程避光操作。
(注：以上稀釋比例僅供參考，實際最佳工作濃度需根據一抗的效價及具體實驗體系通過滴定實驗確定。)
六、 儲存條件與試劑養護指南
熒光試劑極其脆弱，科學的儲存方式直接關系到試劑的壽命與實驗的成敗。
• 運輸條件：產品通常采用藍冰（Blue Ice）冷鏈運輸，以防溫度波動造成抗體變性或熒光淬滅。
• 短期儲存（1-2周內）：置于2°C - 8°C冰箱冷藏即可。
• 長期儲存：收到產品后，建議根據單次實驗用量進行分裝（Aliquot），保存于-20°C。在此條件下，試劑可穩定保存12個月。
• 避光要求：Alexa Fluor® 488對光敏感，無論在液態儲存還是實驗操作過程中，均需嚴格避光（可包裹鋁箔紙或使用棕色管）。
• 禁忌事項：絕對避免反復凍融！反復凍融會導致抗體蛋白聚集變性，不僅嚴重削弱結合能力，還會增加非特異性背景。
七、 常見問題排查與解決方案 (Troubleshooting)
問題一：背景信號過高，整個視野一片綠（高背景）
原因分析與對策：這可能是二抗濃度過高導致的。建議進行濃度梯度摸索，降低二抗稀釋比例（如從1:200降至1:500或更低）。另外，封閉不充分也是罪魁禍首，可適當延長封閉時間至1-2小時，或提高封閉液中BSA/血清的濃度。此外，洗滌不夠極易殘留游離二抗，務必增加洗滌次數（如增至5次）并延長每次浸泡洗滌的時間。
問題二：陽性信號微弱甚至檢測不到
原因分析與對策：首先確認一抗是否有效結合，可設置一抗陽性對照。其次，檢查二抗是否失活，避免將其長時間暴露在強光或高溫環境下。如果細胞/組織通透不足，一抗無法進入，也會導致信號缺失，此時需優化透化劑（如Triton X-100）的作用時間與濃度。
問題三：流式檢測時出現大量雙峰或異常高值
原因分析與對策：這往往是因為細胞成團或未充分吹打為單細胞懸液所致。在加入二抗前，務必確保細胞經過充分的過濾（如使用40 µm細胞篩）或輕柔吹打。同時，檢查二抗是否發生聚集，若長期儲存不當，高濃度的甘油可能導致試劑析出，上機前可進行短暫離心（10,000 g, 5分鐘）取上清使用。
關鍵詞：Abcam、艾博抗、abcam抗體、二抗、免疫熒光二抗、Alexa Fluor 488二抗、山羊抗兔二抗、熒光二抗、細胞成像試劑、流式抗體、免疫組化二抗、多重染色二抗、低背景二抗、光穩定二抗、Alexa Fluor 488標記抗體、ab150077、山羊抗兔IgG、免疫檢測試劑、二抗推薦、科研抗體
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（注：本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理，具體以品牌信息文檔為準。）
??Abcam熱賣產品
貨號 | 品名 | 規格 | 品牌 |
ab150077 | Goat Anti-Rabbit IgG H&L (Alexa Fluor® 488) | 500ug | Abcam |
ab6721 | Goat Anti-Rabbit IgG H&L (HRP) (ab6721) | 1mg | Abcam |
ab212165-1x96tests | Human Lipoprotein A ELISA Kit | 1x96tests | Abcam |
ab150113 | Goat polyclonal Secondary Antibody to Mouse IgG - H&L (Alexa Fluor® 488) | 500ug | Abcam |
ab190289 | Anti-c-Fos antibody (ab190289) | 100ul | Abcam |
ab6789 | Goat Anti-Mouse IgG H&L (HRP) | 1mg | Abcam |
ISB1L(ab119211) | InstantBlue | 1L | Abcam |
ab177487-100ul | Recombinant Anti-NeuN antibody [EPR12763] - Neuronal Marker (ab177487) | 100ul | Abcam |
ab150080 | Goat Anti-Rabbit IgG H&L (Alexa Fluor® 594) | 500ug | Abcam |
ab150115 | Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 647) | 500ug | Abcam |
ab16667 | Recombinant Anti-Ki67 antibody [SP6] (ab16667) | 100ul | Abcam |
AB1187 | Anti-6X His tag®抗體(HRP) | 100ug | Abcam |
ab205718 | Goat Anti-Rabbit IgG H&L (HRP) (ab205718) | 500ug | Abcam |
ab278121-1x96tests | Human MASP2 ELISA Kit | 1x96tests | Abcam |
ab102850 | Alkaline phosphatase Conjugation Kit - Lightning-Link® (ab102850) | 1mg | Abcam |
ab205719 | Goat Anti-Mouse IgG H&L (HRP) | 500ug | Abcam |
ab150116 | Goat Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 594) | 500ug | Abcam |
ab4674-50ul | Anti-GFAP抗體(ab4674) | 50ul | Abcam |
ab32072-100ul | Recombinant Anti-c-Myc antibody [Y69] (ab32072) | 100ul | Abcam |
ab104224-100ug | Anti-NeuN antibody [1B7] - Neuronal Marker | 100ug | Abcam |
ab51995 | AGE-BSA | 10mg | Abcam |
ab240996-1x96tests | CHO HCP ELISA kit (Host cell protein) | 1x96tests | Abcam |
ab208577 | Anti-N6-methyladenosine (m6A) antibody [17-3-4-1] (ab208577) | 100ug | Abcam |
ab290 | Anti-GFP antibody (ab290) | 50ul | Abcam |
ab263899 | Recombinant Anti-NLRP3 antibody [EPR23094-1] (ab263899) | 100ul | Abcam |
ab104139 | Mounting Medium With DAPI - Aqueous, Fluoroshield (ab104139) | 20ml | Abcam |
ab215715 | Recombinant Anti-TGF beta 1 antibody [EPR21143] | 100ul | Abcam |
ab150073 | Donkey Anti-Rabbit IgG H&L (Alexa Fluor® 488) (ab150073) | 500ug | Abcam |
ab83366 | Iron Assay Kit (Colorimetric) (ab83366) | 100tests | Abcam |
ab178846 | Recombinant Anti-Iba1 antibody [EPR16588] (ab178846) | 100ul | Abcam |
ab171529 | 450 nm Stop Solution for TMB底物 | 100ml | Abcam |
ab150079 | Goat Anti-Rabbit IgG H&L (Alexa Fluor® 647) (ab150079) | 500ug | Abcam |
ab5076 | Anti-Iba1 antibody (ab5076) | 100ug | Abcam |
ab15580 | Anti-Ki67 antibody (ab15580) | 100ug | Abcam |
ab184787 | Recombinant Anti-Caspase-3 antibody [EPR18297] (ab184787) | 10ul | Abcam |
ab108823-1x96tests | Human Complement C3 ELISA Kit | 1x96tests | Abcam |
ab51257 | Anti-Polyethylene glycol antibody [PEG-B-47 | 100ug | Abcam |
ab6673-100ug | Anti-GFP antibody | 100ug | Abcam |
ab65329-100tests | Total Antioxidant Capacity Assay Kit | 100tests | Abcam |
ab316860-100ul | 重組Anti-EBV核Antigen/EBNA1抗體[EPR28706-78] (ab316860) | 100ul | Abcam |
ab179515 | 重組Anti-pro Caspase-1 + p10 + p12抗體[EPR16883] | 100ul | Abcam |
ab6326 | Anti-BrdU antibody [BU1/75 (ICR1)] - Proliferation Marker (ab6326) | 100ug | Abcam |
ab7403 | Streptavidin (HRP) | 500ug | Abcam |
ab209845 | Recombinant Anti-GSDMD antibody [EPR19828] (ab209845) | 100ul | Abcam |
ab51608 | Recombinant Anti-HIF-1 alpha antibody [EP1215Y] (ab51608) | 100ul | Abcam |
ab192890 | Recombinant Anti-LC3B antibody [EPR18709] - Autophagosome Marker | 100ul | Abcam |
ab53090 | Anti-Metabotropic Glutamate Receptor 5 antibody (ab53090) | 100ug | Abcam |
ab182422 | 重組Anti-CD163抗體[EPR19518] | 100uL | Abcam |
ab32503 | Recombinant Anti-Bax antibody [E63] (ab32503) | 10ul | Abcam |
ab125066-100ul | Recombinant Anti-Glutathione Peroxidase 4 antibody [EPNCIR144] (ab125066) | 100ul | Abcam |
ab108319 | Recombinant Anti-BDNF antibody [EPR1292] (ab108319) | 100ul | Abcam |
ab181421 | Human TNF alpha ELISA Kit | 1 x 96 tests | Abcam |
ab141704 | Clozapine N-oxide, Metabolite of Clozapine (ab141704) | 100mg | Abcam |
ab16667-500ul | Recombinant Anti-Ki67 antibody [SP6] (ab16667) | 500ul | Abcam |
ab98596 | Goat F(ab')2 Anti-Human IgG - Fc (PE), pre-adsorbed | 500ug | Abcam |
ab208942 | Anti-c-Fos antibody [2H2] (ab208942) | 100ul | Abcam |
ab272686-100ug | Anti-VZV gE蛋白抗體[#9] | 100ug | Abcam |
ab125963-1x96tests | Human Complement C5 ELISA Kit | 1x96tests | Abcam |
ab209959-100ul | Alexa Fluor? 488 Anti-PD-L1 antibody [28-8] | 100ul | Abcam |
ab171529-1000ml | 450 nm Stop Solution for TMB底物 | 1000ml | Abcam |
ab6728 | Rabbit Anti-Mouse IgG H&L (HRP) | 1mg | Abcam |
ab125243 | Anti-DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody [FG4R] | 100ug | Abcam |
ab102890 | HRP Conjugation Kit - Lightning-Link® | 3x 100 ug | Abcam |
ab81289-100ul | Anti-CD34 antibody [EP373Y] | 100ul | Abcam |
ab219800-100ul | Recombinant Anti-GSDMD antibody [EPR20859] (ab219800) | 100ul | Abcam |
ab150081 | Goat Anti-Rabbit IgG H&L (Alexa Fluor® 488) preadsorbed (ab150081) | 500ug | Abcam |
ab7260 | Anti-GFAP antibody (ab7260) | 50ul | Abcam |
AB32503-100 | Recombinant Anti-Bax antibody [E63] (ab32503) | 100ul | Abcam |
ab184857 | Human GLP1 (7-36) ELISA Kit | 1 x 96 tests | Abcam |
ab223582 | 重組Anti-EpCAM抗體[EPR20532-225] | 100ul | Abcam |
ab5103 | Anti-Histone H3 (citrulline R2 + R8 + R17) antibody | 100ug | Abcam |
ab97225 | Goat Anti-Human IgG Fc (HRP) | 1mg | Abcam |
ab48394 | Anti-LC3B antibody - Autophagosome Marker (ab48394) | 100ul | Abcam |
ab5929 | Goat F(ab')2 Anti-Mouse IgM mu chain (Biotin) | 250ug | Abcam |
ab18207 | Anti-beta III Tubulin antibody - Neuronal Marker (ab18207) | 100ug | Abcam |
ab64693 | Anti-Mannose Receptor antibody | 100ug | Abcam |
ab179483 | Recombinant Anti-HIF-1 alpha antibody [EPR16897] | 100Ul | Abcam |
ab244926 | 重組Anti-Thymidine Kinase 1/TK1抗體- BSA and Azide free (Detector) | 100ug | Abcam |
ab8245 | Anti-GAPDH antibody [6C5] - Loading Control (ab8245) | 100ug | Abcam |
ab214488-100ul | Recombinant Anti-TROP2 antibody [EPR20043] | 100ul | Abcam |
ab20425-250ul | HRP Anti-E. coli antibody | 250ul | Abcam |
ab106749-100ul | HRP Anti-Growth Hormone antibody [KT34] | 100ul | Abcam |
ab65336-100tests | Triglyceride Assay Kit - Quantification | 100tests | Abcam |
ab213524 | Recombinant Anti-PD-L1 antibody [EPR19759] (ab213524) | 100ul | Abcam |
ab6858 | Goat Anti-Human IgG H&L (HRP) (ab6858) | 1mg | Abcam |
ab197244 | Glycolysis Assay [Extracellular acidification] (ab197244) | 96 tests | Abcam |
ab34710 | Anti-Collagen I antibody (ab34710) | 100ug | Abcam |
ab178945-10ul | Recombinant Anti-iNOS antibody [EPR16635] (ab178945) | 10ul | Abcam |
ab76003-40ul | Recombinant Anti-MMP9 antibody [EP1254] (ab76003) | 40ul | Abcam |
ab68477-10ul | Recombinant Anti-Heme Oxygenase 1 antibody [EPR1390Y] (ab68477) | 10ul | Abcam |
Ab52987 | Recombinant Anti-p75 NGF Receptor antibody [EP1039Y] (ab52987) | 100ul | Abcam |
ab137869 | Recombinant Anti-Tyrosine Hydroxylase antibody [EP1532Y] (ab137869) | 100ul | Abcam |
ab8227 | Anti-beta Actin antibody (ab8227) | 50ug | Abcam |
ab108821 | Corticosterone ELISA試劑盒(ab108821) | 1 x 96 tests | Abcam |
ab1791 | Anti-Histone H3 antibody - Nuclear Marker and ChIP Grade (ab1791) | 100ug | Abcam |
ab183628 | Anti-mCherry antibody (ab183628) | 100ul | Abcam |
ab243379 | Anti-ZNF18 antibody (ab243379) | 100ul | Abcam |
ab217344 | Recombinant Anti-CD8 alpha antibody [EPR21769] (ab217344) | 10Ul | Abcam |
ab150105 | Donkey Anti-Mouse IgG H&L (Alexa Fluor® 488) (ab150105) | 500ug | Abcam |
ab76302 | 重組Anti-NF-kB p65 (phospho S536)抗體[EP2294Y] (ab76302) | 10ul | Abcam |
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