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大腸桿菌細胞廣泛用于生物制藥的生產。在藥物開發過程中，殘留宿主細胞蛋白 (HCP) 的分析對于確保生物制藥的質量和安全非常重要。對于大腸桿菌，HCP 模式受應用制造條件的強烈影響。僅使用一組抗體的傳統通用測定法并不能充分代表這種多樣性。為了克服與傳統通用 HCP 檢測相關的限制，BioGenes 開發了增強型通用 E.coli|360-HCP ELISA，它由一組四種不同的通用試劑盒組成。
1)大腸桿菌菌株的遺傳背景
不同大腸桿菌菌株的基因組表現出顯著的多樣性。典型的大腸桿菌基因組編碼約。4,500 - 5,000 個基因，其中大約 50% 的基因存在于核心基因組中。據估計，大腸桿菌的泛基因組包括約。128,000 個基因，因此攜帶了大量潛在的 HCP 物種。
2) 細胞培養條件
大腸桿菌的基因表達高度依賴于細胞的生長階段、培養基和補充劑的類型以及生長條件。中樞代謝途徑的重組、應激相關基因的表達和底物降解酶的分泌主要受營養物質的有效性和細胞應激條件（如溫度、氧氣和鹽度）的影響。
3) 重組藥物的性質
重組（外來）蛋白的過表達可導致重組菌株的蛋白質組在代謝功能蛋白、伴侶蛋白和熱休克蛋白的表達模式方面發生顯著變化。
所有這些條件共同影響了在大腸桿菌發酵過程中發生的* HCP 譜，沒有單一的通用試劑盒能夠檢測每一個 HCP。E.coli|360-HCP ELISA
使用不同組的抗 HCP 抗體提供更高的檢測特異性和靈敏度，分為四種試劑盒類型（A 型、C 型、D 型、E 型），用于優化 HCP 檢測。
大腸桿菌抗原的遺傳背景：BL21 (DE3) & W3110
發酵培養基：LB培養基和礦物培養基
由于難以預測大腸桿菌中的 HCP 譜，我們建議先測試所有四種試劑盒類型，然后根據 ELISA 關鍵參數（如稀釋線性、準確度和總覆蓋率）選擇性能最佳的試劑盒。
| 類型 | 細胞系 | 生長培養基 |
|---|---|---|
| A型（第二代即將發布） | BL21 (DE3) | 礦物介質 |
| E型 | W3110 | 礦物介質 |
| D型（第二代即將發布） | BL21 (DE3) | LB培養基 |
| C型 | W3110 | LB培養基 |
根據 REACH（化學品的注冊、評估、授權和限制）法規 (EC) No 1907/2006 的附件 XIV，Triton™ X-100（包含 4-(1,1,3,3-四甲基丁基)苯酚，乙氧基化）將在 2021 年 1 月 1 日之前在我們所有的 ELISA 試劑盒組件中被 TWEEN®20（聚山梨醇酯 20）取代。
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