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      殘留DNA提取試劑盒

      更新時間:2020-05-06      點擊次數:3538

      殘留DNA提取試劑盒(碘化納法) 

      殘留DNA提取試劑盒遵照中國藥典記載的碘化納法,適用于疫苗和治療用生物制品所含宿主細胞殘余DNA的提 取。

      殘留DNA提取試劑盒可以提取樣品中含有的極微量的DNA,回收率較高。

      DNA的提取操作時間為60-90 min。

      提取的DNA可以通過qPCR進行定量。

      ◆特點

      ● 遵照中國藥典登載的碘化納法

       ● 高回收率

      ● 單管操作(無需換管) ,耗時僅60-90 min

      ● 不需要苯酚和氯方等有機溶劑

      ● 兼容多種DNA *1 為使DNA檢測方法與標準保持同步,中國藥典(The Chinese Pharmacopoeia)宣布建立殘留細胞 *1 DNA檢測國家標準。碘化納法將作為殘留DNA提取方法,被新增至2020版的中國藥典中。

      ◆原理 1. 使樣品中的蛋白質和脂質溶于碘化納和N-月桂基肌氨酸鈉; 2. 異丙醇與糖原選擇性地共沉淀DNA。

       

      ◆使用方法

       

      方法1 

      應用實例 DNA spiking test(加標回收實驗) 

       

      DNA Extractor™ Kit可以高產量提取殘留DNA,甚至少量殘留DNA。 

       

      上海起發Ivy Fine Chemicals B48202現貨

      貨號品名規格品牌
      B48202100L Glycogen Solution;1 mL Detergent Combo Solution;25 mL Sodium Iodide Solution;30 mLWashing Buffer (No Ethanol)DNA提取器試劑盒 kit  Ivy Fine Chemicals

       

      Ivy Fine Chemicals Corporation,

      目錄號B48202,50 次浸提,

      4 ℃ 下可穩定儲存 2 年

      僅供實驗室使用

       

      溶液制備:

      向清洗緩沖液中加入 70 mL 乙醇,

      向碘化納溶液中加入 50 L 糖原

      向清洗緩沖液中加入 2 L 糖原

       

      DNA 提取程序:

      向 2 mL 微量離心管中加入 500 L 各樣品或稀釋液

      向各試管中加入 20 L 清潔劑組合溶液,并輕輕渦旋

      • 選項:如果高濃度的蛋白質干擾 DNA 提取和隨后的 DNA 分析,每個樣品用 20 L 蛋白酶 K (10 mg/mL) 在 60 C 消化 20 min,然后在 95 C 滅活酶 5 min

      向各微量離心管中加入 500 L 碘化納溶液,輕輕渦旋

      在 50 ℃ 下孵育 10 min

      加入 900 L 異丙醇并渦旋。

      室溫下孵育 30 min

      以 12000 rpm 離心 15 min

      輕輕倒出或吸取上清液

      加入 1.8 mL 洗滌緩沖液(含乙醇)并渦旋

      以 12000 rpm 離心 10 min

      輕輕倒出或吸取上清液

      風干 DNA

      加入 20-60 L 水,輕輕渦旋溶解 DNA

      純化的 DNA 可通過 PCR、real time PCR、限制性內切酶切、DNA 測序、Picogreen 熒光染色進行分析

      流程圖:

       

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