GMP級干細胞凍存液

上海起發(fā)實驗試劑有限公司amsbio專業(yè)代理，AMSBIO成立于1987年，公司由艾倫和亞歷克斯聯(lián)合創(chuàng)立，總部位于西班牙馬德里，AMSBIO在意大利，瑞士和英國均有辦事處。AMSBIO的使命是成為一個生命科學研究的試劑和服務(wù)幫助客戶開發(fā)創(chuàng)新的方法，過程，產(chǎn)品和藥品的首要供應(yīng)商，為學術(shù)團體和生物技術(shù)合作伙伴提供的技術(shù)和成本有效的解決方案。

Amsbio  STEM-CELLBANKER® 說明書

品牌：Amsbio

貨號： 11897 

品名： STEM-CELLBANKER

描述：GMP Grade Stem Cell Cryopreservation Media

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

STEM-CELLBANKER ^®是GMP下生產(chǎn)的ES細胞和iPS細胞凍存液 產(chǎn)品特點是化學成分清晰，無動物源成分，專門針對ES細胞和iPS細胞特點設(shè)計的細胞凍存液

·  化學成分清楚和無動物源成分

·  按照日本，歐盟，美國和PIC / S GMP指南生產(chǎn)

·  復(fù)蘇后保持細胞的高活力

·  解凍復(fù)蘇后依然保持干細胞的多能性

·  實現(xiàn)細胞的長期凍存，不管是-80度還是液氮保存都可以保證活性10年以上

·  可以不需要液氮就可以長期保存

·  同樣可以適合組織冷凍保存及其他珍貴細胞凍存

·  STEM-CELLBANKER 已經(jīng)得到美國食品藥物管理局的認證（生物制品評價和研究中心）

STEM-CELLBANKER ^®是*無的血清和動物源性成分的，所有成分*歐洲藥典或美國藥典的要求， 是干細胞治療和應(yīng)用zui合適的細胞凍存液，STEM-CELLBANKER ^®使用方便，不需要特殊設(shè)備和儀器就可以實現(xiàn)干細胞高存活率的凍存和長達10年以上的長期保存。

STEM-CELLBANKER ^®還顯著增加細胞活力，同時保持細胞多能性，和細胞的正常核型和增殖能力，是一般凍存液無法達到的。

應(yīng)用實例

使用STEM-CELLBANKER對人體胚胎干細胞（hESC） 和誘導(dǎo)多能（iPS）干細胞進行實際凍存測試。

測試凍存液：STEM-CELLBANKER凍存液 vs 常規(guī)細胞凍存液（細胞培養(yǎng)基 + 10% DMSO + 血清代替品）
細胞存活率評估方法：trypan Blue 和 Live/Dead assay kit試劑盒

測試結(jié)果：使用STEM-CELLBANKER凍存液的細胞存活率明顯提高，HS293, HS306 and ChiPSA 分別高達９３%、９６%　和９０％，比只有５０％存活率的常規(guī)細胞凍存液高一倍。同時，結(jié)果也顯示STEM-CELLBANKER凍存液沒有給細胞的增殖、分化和染色體組形帶來影響。

STEM-CELLBANKER用于小鼠腎臟組織凍存比較圖：

圖2.將小鼠腎臟切碎成約5平方毫米。將組織樣品或者立即固定用10％福爾馬林或冷凍保存與在-801毫升STEM-CELLBANKER的^ø C一周。冷凍保存的樣品在解凍后立即用10％福爾馬林固定。兩種樣品的石蠟切片用H＆E或抗活性半胱天冬酶3抗體染色。在新鮮和冷凍保存的組織樣品中，壞死或細胞凋亡的跡象都可以忽略不計。在來自各種小鼠器官的組織樣品的情況下獲得了類似的結(jié)果。

STEM-CELLBANKER保存的細胞MRNA保存水平圖

圖3.總RNA從小鼠肺成纖維細胞系的任收獲后立即或在-80與STEM-CELLBANKER凍存后的細胞中提取^ø C一周和解凍。通過DNA微陣列分析比較兩個樣品中的mRNA水平，結(jié)果顯示93％的mRNA在±1.6倍差異的范圍內(nèi)。

 使用STEM-CELLBANKER小鼠胚胎干細胞（129SV）進行實際凍存測試。

細胞株：129SV (Mouse ES cell) 
測試凍存液：ZENOAQ 產(chǎn)品（CELLBANKER 1, 1plus, 2 和 STEM-CELLBANKER）
常規(guī)自培凍存液（90% FBS+10%DMSO 和 90% culture medium + 10%DMSO

操作流程圖：

使用手冊:

細胞冷凍保存方法

選擇凍存處于對數(shù)生長數(shù)的細胞有助于提高復(fù)蘇細胞存活率。

1.    按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。

2.    按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。
（參考：5×105 至 5×106 cells/ml）。

3.    取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)。移去離心管中的上清液。

4.    加入適量的CELLBANKER? 細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為 5×105 至 5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細胞混合液。

5.    將離心管中的細胞混合液分裝于已標示*的冷凍保存管中。

6.    直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。

7.    若研究者需要液氮保存時，可將*凍結(jié)的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。

凍存細胞復(fù)蘇方法

1.    從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃ 振動水浴槽中快速解凍。

2.    待凍存管中細胞混合液*融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。

3.    離心收集培養(yǎng)細胞((參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)，移去上清液。

4.    清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。

5.    加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。

6.    精檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。

儲存方法和保質(zhì)期

儲存于４度以下。 保質(zhì)期３年。3個月以上沒有使用CELLBANKER凍存液的計劃時，盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍結(jié)-解凍過程可能導(dǎo)致的CELLBANKER品質(zhì)下降和性能降低，推薦將 100mL 產(chǎn)品分裝小瓶后，再存放于 4℃以下或－20℃冰箱凍存。

質(zhì)量保障承諾

1.    STEM-CELLBANKER 細胞凍存液經(jīng)過嚴格內(nèi)毒素、pH、滲透壓和微生物檢查，確保產(chǎn)品不含細菌、霉菌以及支原體。

2.    使用小鼠胚胎干細胞（Mouse ES Cells）、Jurkat　和SK-007細胞驗證性能測試凍存細保存活率達８０％以上．

注意事項

1.    CELLBANKER系列產(chǎn)品只供實驗室研究使用，是試劑級產(chǎn)品。

2.    我們推薦用戶在使用本產(chǎn)品之前，事先對所使用的細胞進行至少為期 1 周的
試驗性細胞冷凍保存培養(yǎng)。確認性能后再進行正式凍存。

3.    免責聲明: 本公司將不為任何不正常使用此產(chǎn)品時所發(fā)生的意外負責。

amsbio 其它產(chǎn)品信息：

上海起發(fā)實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務(wù)商

1：*的進口輻射能力，血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。

2：產(chǎn)品種類齊全，經(jīng)營超過700多個品牌，基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。

3：提供加急服務(wù)，貨品一般1-2周到貨。

4：富有競爭力的價格優(yōu)勢，絕大部分價格有優(yōu)勢。

5：多年積累良好的信譽，大部分客戶提供貨到付款服務(wù)。客戶包括清華、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、國藥、fisher等藥企。

6：我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權(quán)代理。

7：我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批發(fā)，歡迎合作。